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| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 保存條件 | 低溫冷藏 |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | AE0034 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
| 組織來源 | 胚胎；肺；成纖維細胞；男性 |
| 細胞形態(tài) | 貼壁 |
| 是否是腫瘤細胞 | 否 |
| CAS編號 | |
| 保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
| 器官來源 | 詳見說明書 |
| 免疫類型 | 詳見說明書 |
| 品系 | 詳見說明書 |
| 生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
| 物種來源 | 人 |
| 包裝規(guī)格 | |
| 純度 | % |
| 是否進口 | 是 |
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 人胚現(xiàn)貨供應
簡稱：HFL1
種屬：人
來源：胚胎；肺；成纖維細胞；男性
培養(yǎng)基：DMEM
狀態(tài)：貼壁
產(chǎn)品規(guī)格：
單位：
貨號：AE0034
基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
使用方法：
收到細胞人胚現(xiàn)貨供應后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預包被。試驗前一天預包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度：調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。
Benzyl carbamate 621-84-1 中文名：氨基甲酸芐酯 分子式：C8H9NO2 度：98.0% 小鼠腦紅蛋白(NGB)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Benzyl 4-hydroxybenzoate 94-18-8 中文名：4-羥基苯甲酸芐酯 分子式：C14H12O3 度：98.0% 小鼠腦啡肽（ENK）ELISA試劑盒 96T 試劑盒 組裝/原裝
Benzyl 4-bromophenyl ketone 2001-29-8 中文名：芐基4-溴代苯基酮 分子式：C14H11BrO 度：98.0% 小鼠末端補體復合物C5b-9(TCCC5b-9)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Benzyl 2-aminoacetate p-sulfonate 1738-76-7 中文名： 分子式：C16H19NO5S 度：98.0% 關鍵詞： 小鼠內(nèi)皮細胞生長因子受體-3(VEGFR-3/Flt-4)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Benzyl 2,4-dihydroxyphenyl ketone 3669-41-8 中文名：2,4-二羥基苯基芐酮 分子式：C14H12O3 度：98.0% 小鼠補體蛋白4(C4)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶-2 英文名稱： maix metalloproteinase 2 規(guī)格： 48T/96T 英文縮寫： MMP-2 Diphenhydramine 中文名：鹽酸苯海拉明 分子式：C17H22ClNO 度：98.0%
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶13(MMP-13)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 DL-2-Amino-n-octanoic acid 644-90-6 中文名：DL-2-氨基正辛酸 分子式：C8H17NO2
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶-1(mouse MMP-1) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進口分裝 Dioxopromethazine 中文名：鹽酸二氧丙嗪 分子式：C17H21ClN2O2S 度：99.0%
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Diosgenin 中文名：薯蕷皂苷元 分子式：C27H42O3 度：98.0%
小鼠基脲敏感性胺氧化酶（SSAO）ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝 Candesartan 中文名：坎地沙坦 分子式：C24H20N6O3
Jacaranone 60263-07-2 中文名： 分子式：C9H10O4 Rat platelet activating factor (PAF) ELISA Kit 大鼠血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒
3-Hydroxychimaphilin 33253-99-5 中文名：3-羥基梅笠草素 分子式：C12H10O3 Humansolublevascularendothelialgrowthfactorreceptor-2,VEGFR-2/sFLK-1ELISAKit 人可溶性內(nèi)皮生長因子受體2(VEGFR-2/sFLK-1)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
Chimaphilin 482-70-2 中文名：梅笠草素 分子式：C12H10O2 HumanE2/ubiquitin-conjugatingenzyme,E2/UBCEELISA試劑盒人泛素結(jié)合酶(E2/UBCE)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
Prerubialatin 1667718-89-9 中文名： 分子式：C27H20O7 組織PAK2激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
(S)-4-Methoxydalbergione 2543-95-5 中文名：(S)-4-甲氧基黃檀醌 分子式：C16H14O3 Humanpermeabilityglycoprotein,P-gpELISAKit人P糖蛋白/滲透性糖蛋白(P-gp)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
人胚現(xiàn)貨供應Sulfadiazine 68-35-9 中文名：磺胺嘧啶 分子式：C10H10N4O2S 兔壞死因子-a(rabbit TNF-a) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進口分裝
Rifampicin 13292-46-1 中文名：利福平 分子式：C43H58N4O12 兔干細胞因子(rabbit SCF) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進口分裝
Dyphylline 479-18-5 中文名：二羥丙茶堿 分子式：C10H14N4O4 兔轉(zhuǎn)化生長因子-a(rabbit TGF-a) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進口分裝
Sulfamethazine 57-68-1 中文名：磺胺二甲嘧啶 分子式：C12H14N4O2S 兔轉(zhuǎn)化生長因子-β1(rabbit TGF-b1) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進口分裝
Lomefloxacin 98079-52-8 中文名：鹽酸洛美沙星 分子式：C17H20ClF2N3O3 兔轉(zhuǎn)化生長因子-b2(rabbit TGF-b2) 作用： ELISA 規(guī)格： 48T/96T 進口分裝
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
